产品货号:
GS1527
中文名称:
三氯醋酸蛋白浓缩试剂盒
英文名称:
TCA Protein Precipitation Kit
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒利用三氯醋酸(Trichloroacetic Acid,TCA)沉淀蛋白质,从而达到浓缩蛋白质浓度的目的,即从低浓度蛋白质溶液进行预处理达到蛋白变性、浓缩、去盐效果。本试剂盒性能稳定,操作方便迅速,浓缩效果强,可浓缩纳克级蛋白,可以用于SDS-PAGE和Western blot前的蛋白样品处理。
组分 | 规格 |
沉淀液A | 2.5mL |
洗涤液B | 30mL |
溶解液C | 1mL |
调和液D | 250μL |
保存:2~8℃,有效期2年。其中洗涤液B易挥发,使用完毕后请用封口膜封好存储。
- 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算,为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能,将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
- 沉淀液A沉淀和洗涤液B洗涤后,对于去除上清的沉淀,用吸水纸吸掉管壁残留的液体,将EP管倒扣在吸水纸上轻轻控几下,以除去残留在管口的液体。
- 离心去上清后用20μL的枪头尽量吸去管底残余的液体,此步骤要快,不然沉淀容易散开,降低蛋白回收率,一般只能够吸到最多几微升液体也可能没有液体,注意不要吸到沉淀,沉淀较少时,有时不一定看得见。
- 如果加入20μL溶解液C后不变成黄色,说明残留TCA被祛除干净,如果变黄,也一般不影响电泳或其他实验,也可以再重复步骤6~7一次,以进一步降低TCA的残留。
- 使用后,请旋紧瓶盖防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
- 沉淀试剂A具有腐蚀性和刺激性,洗涤液B具有挥发性和毒性,请在通风橱中操作使用,并做好防护措施。
- 本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床,治疗和动物体内实验等目的,由此产生的后果,概不承担责任。
- 准备1.5mL干净的离心管,加入200μL需浓缩的蛋白样品液。
- 加入50μL沉淀液A,涡旋振荡10sec,使之充分混匀。
- 冰上静置或放置冰箱冷藏室的低层,孵育1h。
- 移置冷冻离心机中,在4℃,15000rpm(20000g)离心15min。
- 小心去掉上清液和管壁以及管底的液体,保留沉淀。
- 加入600μL洗涤液B涡旋振荡10sec。
- 转至冰上静置或冰箱冷藏室的低层冷藏10min,再4℃,12000rpm(12830g)离心15min得到沉淀。
- 在通风橱中,倒掉上清,沉淀物通风晾干30min或冷冻干燥机上抽干。
- 加入20μL溶解液C并涡旋振荡10sec,如果溶液为黄色,加入1~5μL调和液D,使其变回蓝色。
- 煮沸5min,再于室温,12000rpm(12830g)离心5min。
- 取上清可进行SDS-PAGE电泳相对定量和分子量分析。
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